熒光增白劑在紫外光的照射下產生能量躍遷，進入激發狀態，可以產生一種比照射光波長更長的藍紫光。藍光與黃光互為補色，產品的黃光可以被熒光增白劑反射出來的藍光補正，產生增白效果。

熒光增白劑的增白效應屬于光學上的補色作用，目前熒光增白劑的檢測方法主要有紫外分光光度法、熒光分光光度法、高效液相色譜法(HPLC)。

實驗室用紫外分光光度法對熒光增白劑進行檢測，以N，N一二甲基甲酰胺(DMF)作溶劑，較大吸收波長為364nm，試樣濃度為2-4mg／L時，質量濃度和吸光度線性關系良好，結果準確，重現性好。

紫外分光光度法為熒光增白劑檢測提供了一種簡單、易行、實用、快速的檢測方法，因儀器簡單，操作方便而被廣泛使用，己成為檢測熒光增白劑的重要手段。但在測定過程中要避免陽光照射，盡量縮短檢測時間，以免試樣受光照射發生順一反異構轉換，同時需控制溶液和環境的溫度，避免產生鍍層效應，從而影響測定結果。

熒光分光光度法具有靈敏度高、選擇性好、動態線性范圍寬、重現性好、取樣量少等優點，目前在熒光增白劑的檢測中應用較為廣泛。

實驗室通過研究熒光增白劑的熒光特性，憑借摩爾吸光系數和熒光量子產率，判定在弱堿性極性溶劑中的穩定性，因此熒光分光光度法直接測定即可達到很高的靈敏度。同時，通過對熒光增白劑熒光光譜和標準曲線進行研究，能夠對熒光增白劑的定量的測定。

盡管熒光分光光度法因其靈敏度高、選擇件好、檢出限低等一系列優點被廣泛使用，但同紫外分光光度法一樣，這種方法極易受光線影響，易產生誤差。

HPLC因具有快速、靈敏、易推廣等特點，被廣泛應用于各類物質的分析檢測中，并且因檢測器種類眾多，大大拓寬了應用范圍，而熒光增白劑的檢測多數使用紫外檢測器以及熒光檢測器。高效液相色譜通過保留時間定性，峰面積定量，可以有效地對熒光增白劑進行定性和定量檢測。

HPLC法夠有效地對熒光增白劑進行檢測，準確度及靈敏度較高，但此法所需儀器昂貴，且樣品前處理復雜、分析時間長，操作人員需進行專業培訓，適于專業實驗室內操作，不能實現樣品的現場檢測。